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单细胞裂解液(DNA)图片
产品货号:
BTN130803
中文名称:
单细胞裂解液(DNA)
英文名称:
Single Cell Lysis Solution for DNA
产品规格:
1mL
发货周期:
1~3天
产品价格:
询价

本制品是单细胞DNA检测专用裂解液,可有效抑制DNase在裂解过程中对DNA的破坏,维持DNA的稳定性。裂解物可以直接用于测序和PCR等后续试验。




组分规格
单细胞裂解液(DNA)1mL
说明书1份

保存:-20℃,有效期1年。


待处理样品,液体细胞培养基,PBS溶液,胚胎裂解液。


如何制备单个细胞取决于实验样品和实验者所拥有的仪器设备,此处所列步骤仅针对培养细胞、实体组织、淋巴细胞和卵裂球(2~8细胞胚胎)等材料,对其他材料(如干细胞克隆、胚囊、胚胎组织等),用户需自行选用合适的方法制备单细胞。对已经处于单细胞悬浮状态的细胞(如FACS分离细胞、卵细胞等),则可以跳过制备过程而直接进入单细胞裂解步骤。



一、用培养细胞或实体组织制备单细胞
  1. 按常规胰酶方法处理培养细胞或组织,将细胞重悬于自备的液体细胞培养基中。
  2. 按常规方法对细胞进行计数。
  3. 转移100~4000个细胞到新离心管中,400g离心4分钟沉淀细胞,小心弃上清(培养基)。
  4. 将细胞沉淀重悬于50μL自备PBS溶液中,使其终浓度为2~80个细胞/μL。
  5. 在干净的培养皿上点加数个含5μL的PBS溶液小液滴,加入5μL细胞悬浮液到第一个小液滴中,然后再从第一个小液滴中转移5μL到第二个小液滴,如此系列稀释样品数次,使得其浓度接近每2.5μL液体中含1个细胞,放冰上待用。


二、用卵裂球(blastomere,2~8细胞胚胎)制备单个细胞
  1. 在培养皿中点数个含5μL胚胎裂解液的小液滴。
  2. 显微镜下用微量注射液加入一个卵裂球到一个胚胎裂解液小液滴中。
  3. 转移几次到后面的几个液滴中以便将带入的培养基稀释掉。
  4. 在最后一个液滴中,卵裂球的几个细胞将彼此分开成单个细胞。
  5. 取单个细胞,转移到数个含5μL PBS溶液的小液滴中洗涤掉胚胎裂解液。
  6. 在显微镜下用显微注射仪取只含一个细胞的2.5μL样品并转移到一个200μL的PCR管中待用。同时设置无样品的阴性对照(2.5μL样品中不含细胞)。


三、用单细胞裂解液裂解细胞
  1. 在显微镜下用显微注射仪取2.5μL样品,确认含一个细胞后,将其转移到一个含2.5μL单细胞裂解液的PCR管中。最好同时设置无样品的阴性对照(2.5μL样品中不含细胞)。
  2. 在2.5μL样品中,显微镜下细胞悬液可直接用于单细胞裂解反应。
  3. 裂解后可以放冰上待用,如果长期不用,可以放-80℃保存。


四、单细胞裂解物的PCR扩增
  1. 细胞裂解物从-80℃中取出后,65℃保温10分钟,取出后放冰上待用。
  2. 以一半或全部上步操作得到的细胞裂解物为模板,按常规方法进行PCR反应。

相关搜索:单细胞裂解液(DNA)单细胞裂解液Single Cell Lysis Solution for DNA
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